公告信息：
1材料與方法
1.1標(biāo)準(zhǔn)與試劑
順式及TFA甲酯的單標(biāo)及混標(biāo)分別購(gòu)自Supelco、Fluka及Sigma公司。10%～15%三氟化棚甲醇溶液購(gòu)自Fluka公司，正庚烷（色譜純）購(gòu)自Sigma公司，無(wú)水乙醇、氫氧化鈉、氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉等常用試劑購(gòu)自汕頭西隴化工廠。
1.2儀器
島津氣相色譜儀（帶氫火焰離子檢測(cè)器和全自動(dòng)進(jìn)樣器），萬(wàn)分之一電子天平，六孔恒溫水浴鍋，HA-500A氫空一體機(jī)等。
1.3樣品的選擇
共選擇豆油、低芥酸菜籽油、玉米油、紅花油、牛油、豬油、氫化豆油、氫化棕櫚油、氫化軟棕櫚油9種，均保存于4℃冰箱待檢。
1.4實(shí)驗(yàn)方法
參照ISO15304[3]、AOCSCe1f-96[4]和Ce1h-05方法經(jīng)部分修改，操作步驟如下：取油脂樣品（20～30mg）放入50ml三角燒瓶中，加4ml濃度2%氫氧化鈉-甲醇溶液及沸石，后將冷凝管固定于燒瓶上。在80℃水浴加熱皂化回流直至油滴消失（約10min）。用移液管從冷凝管頂部加5～7ml10%～15%三氟化硼甲醇溶液于三角瓶中，繼續(xù)加熱2min，從冷凝管頂部加3～5ml庚烷，繼續(xù)加熱1min后冷卻至室溫。加少量飽和氯化鈉溶液并輕搖三角瓶數(shù)次，繼續(xù)加氯化鈉溶液至燒瓶頸部。吸取上層溶液過(guò)適量無(wú)水硫酸鈉去除溶液中痕量水后即可注入氣相色譜儀進(jìn)行分析。
1.5儀器條件
為有效分離順式C18:3和C20:0脂肪酸，選用BPX-70毛細(xì)管柱（70%cyanopropylpolysilphenylene-siloxane），柱內(nèi)徑0.25mm，膜厚0.25μm，柱長(zhǎng)60m。進(jìn)樣量1μl，分流比100:1。
1.6結(jié)果及計(jì)算
用GCSolution進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析，面積歸一法計(jì)算結(jié)果，并根據(jù)單標(biāo)定性結(jié)果和本實(shí)驗(yàn)中所使用的毛細(xì)柱等件采用如下定義：將順式C18:0到順式C18:1之間的脂肪酸甲酯（fattyacidmethylesters,FAME）峰定義為反式C18:1；將順式C18:1到順式C18:2之間的FAME峰定義為反式C18:2；將順式C18:2到順式C18:3之間的FAME峰定義為反式C18:3；上述反式C18:1、C18:2、C18:3之和為T(mén)FA含量。
2結(jié)果
2.1油脂中TFA測(cè)定方法的建立（圖1）
對(duì)測(cè)定條件（程序升溫條件、氣體流量、壓力等）反復(fù)摸索，確定脂肪酸分離效果最佳的儀器條件為：進(jìn)樣器溫度250℃，壓力206.8kPa，總流量65.1ml/min，柱流量：1.22ml/min，線速度：26.9cm/min，檢測(cè)器溫度為260℃。采用程序升溫：初始溫度150℃，以3℃/min升至240℃。結(jié)果表明，油脂中的各種脂肪酸可以很好分離，且各實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證結(jié)果接近。
2.2同一實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性(表1，2)
豆油中TFA總量平均為1.34%，而氫化豆油TFA總量則高達(dá)45.31%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。無(wú)論在TFA含量很低的豆油，還是含量非常高的氫化豆油，十次分析結(jié)果的重復(fù)性較好，除個(gè)別含量非常低的脂肪酸RSD大于10%外，其余各脂肪酸組分RSD均小于10%，TFA總和的RSD在豆油和氫化豆油中分別是2.0%和0.3%，說(shuō)明測(cè)定方法有很好的重復(fù)性。
2.3不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的驗(yàn)證（表3～5）
四個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)9種油脂樣品驗(yàn)證其方法的可操作性和實(shí)驗(yàn)室間的精密度，由于篇幅有限，以下僅列出豆油、氫化豆油、豬油的驗(yàn)證結(jié)果。
顯示該方法在不同實(shí)驗(yàn)室有很好的一致性。
豆油、氫化豆油、豬油的TFA總和（TTFA）的RSD分別是5.0%、1.1%和4.6%，均遠(yuǎn)小于10%。
2.4部分動(dòng)植物油脂中TFA含量測(cè)定應(yīng)用上述方法分別測(cè)定玉米油、紅花油、菜籽油、氫化棕櫚油、氫化軟棕櫚油、牛油等樣品中TFA組成和含量，結(jié)果顯示玉米油、紅花油及菜籽油中TFA總含量均低于3%，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致，而氫化植物油由于加氫作用，其TTFA的量隨加工條件、植物油種類(lèi)不同而有較大差異。本實(shí)驗(yàn)中氫化棕櫚油和氫化軟棕櫚油中TTFA分別達(dá)總脂肪的9.28%和16.59%。牛油屬于反芻動(dòng)物油脂，反芻動(dòng)物瘤胃可將部分順式脂肪酸轉(zhuǎn)化成反式，是天然TFA重要來(lái)源。本實(shí)驗(yàn)牛油的TFA含量達(dá)到7.22%，高于植物油，也高于豬油。
3討論
TFA測(cè)定有氣相色譜法、氣-質(zhì)聯(lián)機(jī)和傅立葉紅外法等。其中氣相色譜法因其儀器較易普及、分析方法相對(duì)簡(jiǎn)單而易于推廣。各國(guó)都建立了適合本國(guó)條件的TFA測(cè)定方法。
在脂肪酸計(jì)算方法方面，有面積歸一法、外標(biāo)準(zhǔn)法、內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)法等，其中內(nèi)、外標(biāo)準(zhǔn)法都因標(biāo)準(zhǔn)品價(jià)格昂貴難以購(gòu)買(mǎi)，而測(cè)定的脂肪酸有限，使應(yīng)用受到限制，且在氫化植物油中，各脂肪酸的峰不能完全分開(kāi)，利用內(nèi)、外標(biāo)準(zhǔn)法定量時(shí)都會(huì)使實(shí)驗(yàn)誤差加大，因此本實(shí)驗(yàn)采用面積歸一法進(jìn)行定量。結(jié)果表明，該方法實(shí)驗(yàn)室內(nèi)重復(fù)性好，不同實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果也有很好的一致性（RSD均遠(yuǎn)小于10%）。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)還對(duì)豆油的面積歸一法和內(nèi)標(biāo)法結(jié)果進(jìn)行了比較，證明兩者間一致性很好（表略）。
以上結(jié)果表明該方法可作為動(dòng)植物油脂中TFA的測(cè)定方法，為制定國(guó)標(biāo)方法提供了依據(jù)。
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