苦瓜(Momordica charantia L.)是葫蘆科(Cur.cubitaceae)苦瓜屬(Momordica)植物苦瓜的果實(shí),因具有特殊苦昧而得名。近年來,國(guó)內(nèi)外對(duì)苦瓜的藥理學(xué)和臨床作用進(jìn)行了大量研究,發(fā)現(xiàn)苦瓜對(duì)治療燒傷、皮癢、傷口愈合等疾病有很好的療效。苦瓜籽油是利用苦瓜籽提取苦瓜多肽蛋白的副產(chǎn)物,研究發(fā)現(xiàn)苦瓜籽油具有抗氧化、抗癌、降血脂等生理功能,目前對(duì)這方面的研究也較多,但對(duì)苦瓜籽油脂肪酸組成變化等方面的分析研究較少。
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本文采用正丁烷浸提法提取苦瓜籽仁得苦瓜籽油,經(jīng)氣相色譜分析脂肪酸組成,同時(shí)對(duì)比新鮮的和放置兩個(gè)半月的苦瓜籽油中脂肪酸組成的變化,為苦瓜籽油的開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時(shí)為苦瓜籽的綜合利用提供依據(jù)。
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1 材料與方法
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1.1 材料、儀器
苦瓜籽(北京某公司),脫殼處理。
脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品:CLA(9clIt—CLA,8tlOc—CLA,1lcl3t—CLA,10tl2c—CLA),美國(guó)Nu—Chek—Prep公司。
乙醚、乙醇、正丁烷、CH3OH、硫酸、硫酸銨、三氟化硼、硫酸銅、無水Na2SO4、HCl、NaOH、韋氏試劑、硫代硫酸鈉、KI、淀粉、酚酞、甲基紅、溴甲酚綠、蔗糖、NaCl均為分析純;異辛烷為色譜純。6980N型氣相色譜儀(Agilent公司),索氏抽提器,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,TGL一16C高速離心機(jī),101A一1型電熱鼓風(fēng)干燥箱,微量凱氏定氮儀,BS 210s電子分析天平,破碎機(jī),水浴鍋,干燥器,60目篩。
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1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 苦瓜籽理化指標(biāo)測(cè)定
水分及揮發(fā)物按照GB/T 14489.1—2008測(cè)定,含油量按照GB/T 14488.1-2008測(cè)定,粗蛋白按照GB/T 14489.2-2008測(cè)定。
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1.2.2 苦瓜籽油提取
將脫殼的苦瓜籽粉碎,過60目篩后,經(jīng)正丁烷(從提高溶劑的回收率和油脂的提取率角度考慮,本試驗(yàn)采用正丁烷作為浸提溶劑)溶劑浸提后,減壓蒸發(fā)回收溶劑,得苦瓜籽油。
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1.2.3 苦瓜籽油理化指標(biāo)測(cè)定
酸值按GB/T 5530-2005測(cè)定,碘值按GB/T5532-2008測(cè)定,皂化值按GB/T 5534-2008測(cè)定,不皂化物按GB/T 5535-2008測(cè)定。
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1.2.4 苦瓜籽油脂肪酸組成分析
1.2.4.1 脂肪酸甲酯化
稱取0.2 g提取的苦瓜籽油,加入0.5 mol/L的NaOH—CH3OH溶液4 mL,置于50 mL的燒瓶中,于60℃ 水浴回流30 min,用移液管從冷凝器頂部加人5 mL 12% 的三氟化硼一甲醇溶液,繼續(xù)煮沸30min。再用同樣方法加入3 mL異辛烷,冷卻后加入20 mL飽和NaC1溶液,振蕩后繼續(xù)加飽和NaC1溶液至燒瓶頸部,靜置分層。最后取2 mL上層溶液加適量無水Na2SO4 干燥后備用。
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1.2.4.2 氣相色譜分析
分別對(duì)新鮮的和放置兩個(gè)半月的苦瓜籽油進(jìn)行氣相色譜測(cè)定,分析其脂肪酸組成和含量的變化。氣相色譜條件:色譜柱為CP—Si188熔融石英毛細(xì)管柱(100 m×0.25 mm,Chrompack Bridgewater,NJ),N 為載氣,H2、空氣為燃燒氣。FID溫度250℃ ,進(jìn)樣口溫度250℃ 。程序升溫過程:45℃ 保持3 min后以13~C/min的升溫速率將溫度升至175 ,保持27 min后以4~C/min的升溫速率將溫度升至215 ℃,保持5 min。測(cè)定時(shí)間為86 min。
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2 結(jié)果與分析
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2.1 苦瓜籽理化指標(biāo)(見表1)
從表1結(jié)果可知,苦瓜籽含油量為42.2% ,粗蛋白含量為36.4% 。含油量和粗蛋白含量都較高。
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2.2 苦瓜籽油理化指標(biāo)
苦瓜籽經(jīng)正丁烷提取,減壓濃縮得苦瓜籽油,新鮮的苦瓜籽油呈淺黃色液體,冷卻至室溫即呈奶白色固態(tài),具有辣喉味。放置兩個(gè)半月后白色固體色澤變黃。這可能是苦瓜籽油的脂肪酸組成發(fā)生改變所導(dǎo)致的。
新鮮苦瓜籽油主要理化指標(biāo)見表2。
從表2可看出,苦瓜籽油的碘值(I)在100—130 g/100 g之間,屬半干性油;苦瓜籽油的皂化值(KOH)小于200 mg/g,根據(jù)皂化值和相對(duì)分子質(zhì)量的關(guān)系,推測(cè)其所含脂肪酸以十八碳脂肪酸為主。
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2.3 苦瓜籽油脂肪酸組成
為了確定新鮮的和放置兩個(gè)半月的苦瓜籽油脂肪酸組成和含量是否改變,分別對(duì)新鮮的和放置兩個(gè)半月的苦瓜籽油進(jìn)行氣相色譜分析,氣相色譜圖見圖1、圖2,其脂肪酸組成分析結(jié)果見表3。
從表3可知,苦瓜籽油含有26種脂肪酸,以多不飽和脂肪酸為主要成分,這與吳丹等報(bào)道的苦瓜籽油中含有25種脂肪酸和以單不飽和脂肪酸為主要成分有出入,同時(shí)與劉旭慶等報(bào)道的各脂肪酸含量也有差異,這可能與苦瓜籽原料的采摘期和油脂提取方法有關(guān)。
同時(shí),從表3中可知,新鮮的苦瓜籽油經(jīng)放置兩個(gè)半月后兩種異構(gòu)體9clltl3t一共軛十八碳三烯酸( α一桐酸)和9tlltl3c一共軛十八碳三烯酸(α一桐酸異構(gòu)體)的含量變化很大,分別為新鮮的54.26%對(duì)應(yīng)放置兩個(gè)半月的35.63% 和新鮮的2.42% 對(duì)應(yīng)放置兩個(gè)半月的19.09% 。分析原因可能是經(jīng)放置后α一桐酸在空氣、日光等作用下不穩(wěn)定,構(gòu)型發(fā)生變化,從而引起含量上的變化。
研究發(fā)現(xiàn)9cl 1 tl3t一共軛十八碳三烯酸是一種主要的共軛亞麻酸(CLN),CLN在體外具有強(qiáng)烈的抗癌活性和降血脂功效。因此,苦瓜籽油具有的抗氧化、抗癌、降血脂作用可能與所含的9clltl3t一共軛十八碳三烯酸有關(guān)。
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3 結(jié)論
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(1)苦瓜籽仁中含油量為42.2% ,屬于高含油油料。
(2)經(jīng)氣相色譜分析,苦瓜籽油中共軛十八碳三烯酸的兩種異構(gòu)體含量在新鮮的和放置兩個(gè)半月的變化很大,分析原因可能是旺一桐酸在空氣中不穩(wěn)定,經(jīng)放置和日光等作用下轉(zhuǎn)變?yōu)?α一桐酸異構(gòu)體。
(3)苦瓜籽油所含的α一桐酸是一種主要的共軛亞麻酸(CLN),其具有抗氧化、抗癌、降血脂作用,這為苦瓜籽油在醫(yī)藥和保健食品中的應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。