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油脂TBA值的測(cè)定方法

來(lái)源:環(huán)球糧機(jī)網(wǎng)發(fā)布時(shí)間:2015-05-07 17:24:44

⒈  原理:
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用,發(fā)生酸敗反應(yīng),分解出醛、酸之類(lèi)的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種,它能與TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉紅色化合物,在538nm波長(zhǎng)處有吸收高峰,利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量,從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。
⒉  試劑:
TBA水溶液:準(zhǔn)確稱(chēng)取TBA0.288g溶于水中,并稀釋至100ml(如TBA不易溶解,可加熱至全溶澄清,然后稀釋至100ml),相當(dāng)于0.02M;
三氯乙酸混合液:準(zhǔn)確稱(chēng)取三氯乙酸(分析純)7.5g及0.1gEDTA,用水溶解,稀釋至100ml;
氯仿(分析純);
丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱(chēng)取0.315g 1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀釋至1000ml,此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100ug,置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml,稀釋至100ml,此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10ug,備用。
⒊  操作步驟:
⑴標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每相當(dāng)于丙二醛10ug的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中,加水至總體積為5ml,加入5mlTBA溶液,然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行,測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
⑵樣品測(cè)定:
準(zhǔn)確稱(chēng)取融化均勻的油脂樣品5-10g,置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi),加入25ml三氯乙酸混合液,振搖半小時(shí)(保持油脂融溶狀態(tài),如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖)用雙層濾紙過(guò)濾,除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過(guò)濾一次。
準(zhǔn)確移取上述濾液5ml置于25ml比色管內(nèi),加入5mlTBA溶液,混勻,加塞,置于90℃水浴內(nèi)保溫40min,取出,冷卻1h,移入小試管內(nèi),離心5min,上清液傾入25ml納氏比色管中,加入5ml氯仿,搖勻,靜置,分層,吸出上清液于532nm波長(zhǎng)比色,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)(同時(shí)做空白試驗(yàn))。
⒋  計(jì)算
丙二醛含量(mg/kg)=
式中:C——從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
      m——樣品質(zhì)量(g)
 
光密度:TBA(A532/kg)=
式中:V——油脂用三氯乙酸定容體積,ml
      V1——取濾液體積,ml
      V2——加TBA體積,ml
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