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近年來(lái)，港澳市民因食用含農(nóng)藥的蔬菜而中毒的事件時(shí)有發(fā)生，農(nóng)藥殘毒問(wèn)題成為人們普遍關(guān)心的社會(huì)問(wèn)題。我省輸港澳蔬菜占港澳市場(chǎng)的八成以上，每天分別由全省的200多家蔬菜種植場(chǎng)及收購(gòu)站裝運(yùn)出口就達(dá)300多車次。廣東輸港澳蔬菜的特點(diǎn)是蔬菜即采收即包裝發(fā)運(yùn)，而且裝運(yùn)的蔬菜絕大部分是保存期很短的葉菜類，因此蔬菜的農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作必須要在菜場(chǎng)、收購(gòu)站或口岸等蔬菜發(fā)運(yùn)點(diǎn)完成，而且要求盡快拿出檢測(cè)結(jié)果，不耽誤蔬菜裝運(yùn)出口。農(nóng)藥速測(cè)卡可以滿足這方面的要求，使用方便又能快速檢測(cè)，不僅可以讓檢驗(yàn)檢疫工作人員在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，而且可以讓菜場(chǎng)和收購(gòu)站的植保員在生產(chǎn)收購(gòu)過(guò)程中使用，充分發(fā)揮生產(chǎn)部門(mén)自己把關(guān)的意識(shí)和責(zé)任，把不合格的因素及時(shí)消滅在生產(chǎn)環(huán)節(jié)中，共同保證出口蔬菜的安全衛(wèi)生。
二、農(nóng)藥速測(cè)卡的研制1 .膽堿酯酶的選擇通過(guò)對(duì)鯇魚(yú)、鰻魚(yú)、鱔魚(yú)、雞、豬、牛、家蠶、家蠅、菜青蟲(chóng)和蝗蟲(chóng)等十幾種不同動(dòng)物的膽堿酯酶進(jìn)行了比較研究，篩選出了一種活性高、穩(wěn)定性好，且對(duì)農(nóng)藥敏感和比較容易獲取的酶源。
2 .膽堿酯酶的固定化研究膽堿酯酶在常溫條件下穩(wěn)定性較差，如果僅僅是簡(jiǎn)單地吸附在濾紙上，酶很快就會(huì)失去活性，農(nóng)藥速測(cè)卡就會(huì)失效。將酶固定在某種特殊的載體上以后，酶的穩(wěn)定性就會(huì)大大地提高，同時(shí)當(dāng)酶片放入水中以后，酶不會(huì)流失，有時(shí)對(duì)抑制劑的敏感性還會(huì)有所提高。通常的固定需要一系列復(fù)雜的化學(xué)處理，條件比較難掌握。我們經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，找到了一種能與膽堿酯酶專一性結(jié)合的載體物質(zhì)，從而使酶的固定化一步就可以完成，降低了生產(chǎn)時(shí)間和生產(chǎn)成本、產(chǎn)品質(zhì)量也變得容易控制。
3 .底物的合成底物是生產(chǎn)農(nóng)藥速測(cè)卡的主要原料，需要量比較大，如果是依靠進(jìn)口，價(jià)格昂貴，每克需500元以上，而且購(gòu)買(mǎi)周期長(zhǎng)，貨源不能保證。我們建立一套合成方法，省去了沉淀、結(jié)晶、干燥等一系列中間過(guò)程，合成后直接轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)用溶液，提高了回收率，大大地降低了成本。
4 .包裝及生產(chǎn)工藝研究農(nóng)藥速測(cè)卡主要由酶片和底物片組成，我們采用了先打?yàn)V片和粘貼，然后才加酶和底物的方法，以減少原料浪費(fèi)和活性在加工過(guò)程中損失，整個(gè)工藝流程可用圖1表示。
大濾紙片小濾紙片※加酶載體※烘干※粘貼→底板加底物→固定化→―加酶→―烘干烘干※切片※封裝生產(chǎn)工藝流程具有以下特點(diǎn)：流程所用設(shè)備簡(jiǎn)單，無(wú)特殊要求，固定資產(chǎn)投資少生產(chǎn)條件容易控制，易于工業(yè)化生產(chǎn)生產(chǎn)過(guò)程無(wú)廢渣廢水排出，不影響環(huán)境，不會(huì)造成污染生產(chǎn)周期短，產(chǎn)品質(zhì)量容易掌握，產(chǎn)量容易滿足市場(chǎng)需要。
為了提高開(kāi)包后使用期限和貯存期的穩(wěn)定性，我們?cè)诿科贉y(cè)卡上加蓋了BOPP薄膜，使每片薄片基本處于獨(dú)立封閉狀態(tài)，使用時(shí)輕輕一扯就可以撕開(kāi)，使用也很方便。
5 .制定產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品包裝：鋁箔袋底片尺寸：22mm×48mm長(zhǎng)方形大藥片直徑及顏色：13 .5mm橙紅色的測(cè)定結(jié)果甲胺磷濃度水胺硫磷濃度二次重復(fù)結(jié)果 敵百蟲(chóng)濃度呋喃丹濃度＊表中農(nóng)藥濃度單位為mg/ kg 表中表示強(qiáng)陽(yáng)性， 表示陽(yáng)性， 表示陰性。
農(nóng)藥名稱配制濃度（mg/kg）甲胺磷水胺硫磷敵百蟲(chóng)呋喃丹小藥片直徑及顏色：11 .5mm白色帶微黃色顯色劑含量（g/片）：≥50膽堿酯酶活性（單位/片）：≥0 .2甲胺磷檢出限（mg/kg）：1.0（弱陽(yáng)性）、5（強(qiáng)陽(yáng)性）敵敵畏檢出限（mg/kg）：0.1（弱陽(yáng)性）、0 .5（強(qiáng)陽(yáng)性）呋喃丹檢出限（mg/kg）：0.1（弱陽(yáng)性）、0 .5（強(qiáng)陽(yáng)性）三、農(nóng)藥速測(cè)卡靈敏度的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證1 .對(duì)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)水溶液的試驗(yàn)將純品甲胺磷、水胺硫磷、敵百蟲(chóng)和呋喃丹配制成系列標(biāo)準(zhǔn)水溶液，然后用農(nóng)藥速測(cè)卡進(jìn)行測(cè)試，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定二次，同時(shí)用清水作空白測(cè)定。
從表中可以看出，農(nóng)藥速測(cè)卡檢出的最低濃度甲胺磷為1 .0mg/kg ，水胺硫磷為5 .0mg/kg ，敵百蟲(chóng)為0 .3mg/kg ，呋喃丹為0 .1mg/kg ，對(duì)清水作的空白對(duì)照試驗(yàn)，均表現(xiàn)為陰性反應(yīng)。
2 .對(duì)添加農(nóng)藥的菜樣的測(cè)定將不含農(nóng)藥的菜心浸入按表2濃度配制的農(nóng)藥水溶液中，二小時(shí)后取出，用清水沖去菜葉表面的農(nóng)藥、晾干、分別用農(nóng)藥速測(cè)卡和氣相色譜儀對(duì)菜樣中的農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定。
濃度浸菜樣的農(nóng)藥速測(cè)卡測(cè)定結(jié)果氣相測(cè)定結(jié)果（mg/kg）重復(fù)Ⅰ重復(fù)Ⅱ重復(fù)Ⅰ重復(fù)Ⅱ甲胺磷水胺硫磷敵百蟲(chóng)呋喃丹抑制時(shí)間1分鐘5分鐘10分鐘15分鐘甲胺磷從上表可以看出，農(nóng)藥速測(cè)卡對(duì)菜樣檢出的的殘留仍表現(xiàn)為陽(yáng)性反應(yīng)，農(nóng)藥速測(cè)卡對(duì)空白菜樣檢測(cè)均表現(xiàn)為陰性反應(yīng)。
3 .檢測(cè)溫度及預(yù)反應(yīng)時(shí)間對(duì)檢測(cè)靈敏度的影響在一定的范圍內(nèi)，抑制時(shí)間（預(yù)反應(yīng)時(shí)間）越長(zhǎng)（即樣品液與白色藥片預(yù)反應(yīng)的時(shí)間越長(zhǎng)），檢測(cè)的靈敏度就越高，有機(jī)磷抑制膽堿酯酶首先是形成一個(gè)不穩(wěn)定的中間復(fù)合體，然后再解離而形成磷?；负推渌a(chǎn)物，酶的磷?；枞似渥饔貌课欢セ钚裕河坞x酶有機(jī)磷酶有機(jī)磷復(fù)合體磷酰化酶有解產(chǎn)物反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，形成磷?；冈蕉?，酶受抑制就越完全，因而靈敏度也就越高（表4）。
最低檢測(cè)限的影響溫度檢測(cè)限（mg/kg）從表中可以看出最佳的抑制時(shí)間為10分鐘。
經(jīng)過(guò)一系列的試驗(yàn)研究，我們發(fā)現(xiàn)提高預(yù)反應(yīng)溫度能提高檢測(cè)的靈敏度，表5是不同預(yù)反應(yīng)溫度對(duì)甲胺磷最低檢測(cè)限的影響（預(yù)反應(yīng)時(shí)間為考慮到實(shí)際操作條件的限制，跟人體溫度相近的38℃為推薦溫度。
4 .對(duì)產(chǎn)品有效期的考察最低檢測(cè)限的影響存放時(shí)間6個(gè)月9個(gè)月12個(gè)月15個(gè)月檢測(cè)限編號(hào)菜樣名稱速測(cè)卡反應(yīng)氣相色譜測(cè)定結(jié)果（mg/ kg）甲胺磷敵敵畏水胺硫磷樂(lè)果通心菜菜心芥蘭通心菜白菜菜心白菜潺菜菜心白菜菜心白菜芥菜生菜豆角菜心節(jié)瓜生菜＊表示強(qiáng)陽(yáng)性， 表示弱陽(yáng)性， 表示陰性。
通過(guò)對(duì)數(shù)批存放一般時(shí)間的農(nóng)藥速測(cè)卡進(jìn)行靈敏度測(cè)試，產(chǎn)品的最佳使用期限為一年（存放在4℃冰箱）。
5 .對(duì)實(shí)際菜樣的測(cè)試對(duì)隨機(jī)的20個(gè)菜樣分別進(jìn)行農(nóng)藥速測(cè)卡和氣相色譜進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果基本滿意，表明農(nóng)藥速測(cè)卡能起很好的區(qū)別有毒蔬菜和無(wú)毒蔬菜的作用。
四、農(nóng)藥速測(cè)卡的推廣應(yīng)用通過(guò)對(duì)農(nóng)藥速測(cè)卡的靈敏度的測(cè)試，表明農(nóng)藥速測(cè)卡能夠滿足口岸把關(guān)檢驗(yàn)的要求。我們研制的農(nóng)藥速測(cè)卡成本比國(guó)外的同類產(chǎn)品便宜20倍，而靈敏度高出4到5倍。經(jīng)過(guò)二年多廣東省商檢系統(tǒng)及其所管轄的菜場(chǎng)收購(gòu)站的使用，效果顯著。同時(shí)香港衛(wèi)生署擯棄了國(guó)外的農(nóng)藥速測(cè)卡，而采用了我們的農(nóng)藥速測(cè)卡對(duì)進(jìn)入香港的蔬菜進(jìn)行監(jiān)控。香港政府化驗(yàn)所評(píng)論：本速測(cè)卡對(duì)甲胺膦和敵百蟲(chóng)的檢測(cè)限相比于國(guó)際準(zhǔn)許之最高殘留量為低，因此可有效地作為這兩種農(nóng)藥在蔬菜殘留進(jìn)行快速篩選測(cè)試。
五、結(jié)論本研究工作成功研制了對(duì)有機(jī)磷類殺蟲(chóng)劑靈敏的農(nóng)藥速測(cè)卡，其使用簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確，可作為口岸、市場(chǎng)等蔬菜農(nóng)藥殘留的抽查檢測(cè)手段，能有效地控制有農(nóng)藥殘留蔬菜流入市場(chǎng)。
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農(nóng)藥速測(cè)卡的研制與應(yīng)用
來(lái)源：環(huán)球糧機(jī)網(wǎng)發(fā)布時(shí)間：2015-06-16 11:29:36
